樣品前處理不規(guī)范是縮短色譜柱壽命的首要元兇。未過(guò)濾的樣品中含有的顆粒物會(huì)堵塞色譜柱篩板和固定相孔隙，導(dǎo)致柱壓驟升、分離效率下降。此外，樣品中的強(qiáng)極性雜質(zhì)、重金屬離子等會(huì)與固定相發(fā)生不可逆吸附，污染色譜柱。規(guī)避此類(lèi)問(wèn)題，需嚴(yán)格做好樣品前處理：液體樣品需經(jīng)0.22μm或0.45μm濾膜過(guò)濾，去除懸浮顆粒；固體樣品需充分提取、離心后取上清液過(guò)濾；對(duì)于復(fù)雜基質(zhì)樣品，可通過(guò)固相萃取、液液萃取等方法去除干擾雜質(zhì)，避免污染物進(jìn)入色譜柱。

 

　　流動(dòng)相配制與使用不當(dāng)同樣會(huì)損傷色譜柱。使用未脫氣的流動(dòng)相，會(huì)因氣泡進(jìn)入色譜柱導(dǎo)致柱內(nèi)壓力波動(dòng)，破壞固定相結(jié)構(gòu)，同時(shí)影響檢測(cè)基線穩(wěn)定性。流動(dòng)相pH值超出色譜柱耐受范圍，會(huì)造成固定相水解、鍵合相脫落，尤其是反相色譜柱，通常耐受pH值為2-8，超出此范圍會(huì)顯著縮短壽命。規(guī)避措施包括：流動(dòng)相配制后需超聲脫氣15-20分鐘，或使用在線脫氣裝置；嚴(yán)格按照色譜柱說(shuō)明書(shū)要求控制流動(dòng)相pH值，必要時(shí)添加緩沖鹽調(diào)節(jié)，且緩沖鹽需用高純度水配制，使用前過(guò)濾；避免長(zhǎng)期使用高濃度鹽溶液作為流動(dòng)相，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后需用純水充分沖洗色譜柱，防止鹽析出堵塞管路。

 

　　色譜條件設(shè)置不合理會(huì)加劇色譜柱損耗。柱溫過(guò)高會(huì)加速固定相老化，導(dǎo)致分離性能衰減，不同類(lèi)型色譜柱有其最佳使用溫度范圍，如反相色譜柱通常不超過(guò)60℃。流速過(guò)快會(huì)增大柱內(nèi)壓力，長(zhǎng)期高壓會(huì)使色譜柱床層塌陷，一般需根據(jù)色譜柱內(nèi)徑選擇合適流速，常規(guī)4.6mm內(nèi)徑色譜柱流速控制在0.8-1.2mL/min。此外，進(jìn)樣量過(guò)大易造成色譜柱過(guò)載，導(dǎo)致峰形拖尾、柱效下降。規(guī)避方法為：嚴(yán)格遵循色譜柱說(shuō)明書(shū)設(shè)定柱溫與流速，避免驟升驟降溫度；根據(jù)色譜柱容量和樣品濃度合理控制進(jìn)樣量，一般進(jìn)樣體積不超過(guò)20μL。

 

　　實(shí)驗(yàn)后色譜柱維護(hù)缺失也是壽命縮短的重要原因。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后未及時(shí)沖洗，流動(dòng)相中的殘留雜質(zhì)會(huì)吸附在固定相表面，長(zhǎng)期積累會(huì)導(dǎo)致色譜柱“失活”。不同類(lèi)型色譜柱沖洗方式不同，反相色譜柱需先用甲醇-水（50:50）沖洗30分鐘，再用純甲醇沖洗20分鐘封存；正相色譜柱則需用正己烷沖洗后封存。同時(shí)，色譜柱存放需避免陽(yáng)光直射、劇烈震動(dòng)，封存液需定期更換，防止細(xì)菌滋生污染色譜柱。